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  • pNEB206A                 收藏

    幸运飞艇冠亚和对刷靠谱吗 www.zkn8.com 详细序列见 www.neb.com。

    订购信息见 20132014 商品目录 129 页。

    以下内切酶在该载体上无酶切点:

    AarI(x), Acc65I, AccI, AfeI, AflII, AgeI, AleI, ApaI, AsiSI, AvaI, AvrII, BaeI, BbsI, BclI, BfuAI, BglII, BlpI, BmgBI, BmtI, BsaAI, BsaBI, BsgI, BsiWI, BsmFI, BsmI, BsoBI, BspDI, BspEI, BspMI, BsrGI, BstBI, BstEII, BstXI, BstZ17I, Bsu36I, BtgI, BtgZI, ClaI, CspCI, DraIII, EagI, EcoNI, EcoRV, FseI, FspAI(x), HincII, HpaI, I-CeuI, I-SceI, KpnI, MfeI, MluI, MscI, NaeI, NcoI, NgoMIV,
    NheI, NotI, NruI, NsiI, PI-PspI, 
    PI-SceI, PaeR7I, PflFI, PflMI, PmlI, PpuMI, PshAI, PsiI, PspOMI, PspXI, RsrII, SacII, SalI, 
    SanDI(x), SexAI, SfiI, SgrAI, SmaI, SnaBI, SpeI, SphI, SrfI(x), StuI, StyI, SwaI, TspMI, Tth111I, XcmI, XhoI, XmaI

    (x) = NEB 不提供该内切酶

     

    pNEB206A 是 E. coli 质粒载体,专门为快速、有效地克隆 PCR 产物而设计,可与 USER Enzyme (NEB #M5505;1)
    联用(1)。它由 pNEB193 衍生而来,带有高拷贝 pUC19 复制起点和 lacZα 基因,可利用 
    α-互补筛选带有插入片段的克?。?)。

    NEB 提供的线性质粒长 2,706 bp(从环状质粒上切
    去 438-453 bp),在克隆位点两侧各有 8 碱基的 3´ 单链突出端的,且两者不互补。按照 NEB 网站上关于“使用 USER 酶进行克隆”的说明,以带有脱氧尿嘧啶的引物扩增,及进一步处理,可以产生带有 5´ 单链突出端的 PCR 产物,且该末端与 pNEB206A 的克隆位点互补。处理后的 PCR 产物可以不经酶切或 DNA 连接酶作用,直接高效克隆进 pNEB206A,形成环状分子。


    黑体字表示该内切酶仅有一个酶切位点;常规字体表示该内切酶有两个酶切位点。限制性位点的位置指识别序列的上条链中 5´ 端第一个碱基的位置。载体图以及表格中所标注的位置是指线性化之前 2,722 bp 的环状质粒,可用来计算相对距离。

    开放性读码框(ORF)是以 “起始翻译到终止翻译” 
    的顺序来标示;数字表示在上条链上的位置(顺时针方向),包括了起始和终止密码子,但转录方向未考虑在内。

    复制起始位点区域是从 RNAⅡ转录本 -35 启动子序
    列到 RNA/DNA 转换位置。bla(ApR)基因的位置包括信号序列??寺∥坏阒感纬苫纷粗柿V暗牡?/span>链序列或线性载体中那些丢失的碱基。

    特点                              位置                               来源

    lacZα                            505-146                          –
    cloning site                 430-461                          –
    origin                            1491-903                       pUC19
    bla (ApR)                     2522-1662                     Tn3
     
    ori = 复制起点
    Ap = 氨苄青霉素
     
     

    参考文献

    (1) Bitinaite, J. and Vaiskunaite, R. (2003) unpublished observations.

    (2) Yanisch-Perron, C. et al. (1985) Gene, 33, 103–119.

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